琼脂糖凝胶电泳色素分离实验
一 .琼脂糖凝胶电泳色素分离实验
——科探方舟 zp07g02n02 组 张梓沐
为了初步了解凝胶电泳的发展历程、琼脂糖凝胶电泳装置的结构、凝胶电泳技术的 原理及其应用,初步判断影响凝胶电泳色素分离的因素 ,我组对此设计了探究实验
8 月 21 日 ,我组将科学盒子开箱,打开了课题研究的大门; 同时通过学习“课程导 入 ”课程 ,为接下来的实验做好了充足的知识储备 。8 月 22 日 ,组长第一次召集组员,
开始进行第一次琼脂糖凝胶电泳色素分离实验。
通过仔细阅读科探方舟实验手册 ,我组成员进行分工合作 ,分别进行制备 1%的碳酸 氢钠缓释液 ,制作胶梳等工作 。在上样孔滴加好色素 ,将电源调为三十五伏后, 电泳开始 进行 。 电泳正常进行了 21 分钟, 色素基本上成功出现分离与迁移的现象 ,但相较于 150
分钟迁移 3-5cm 的实验预期 ,此次凝胶电泳色素分离现象速度过快,且电源适配器在电泳 开始后 21 分钟过热直至无法使用。
此外 ,正极钢丝侧的胶板上出现类似被电焦的现象 。经过小组讨论,初步判断错误原 因是: 第一 ,在用药匙挖出凝胶条时 ,没有控制两侧胶板与两根钢丝之间的距离, 负极钢 丝与胶板直接接触 。经查询可知 ,凝胶同样导电 。 由于胶板是固体、缓冲液是液体 ,胶板 的导电性相较于缓冲液更好, 故装置内通过的电流比正常情况要大,加快了电适配器的变 热的速度; 第二, 电源适配器易损坏; 第三 ,倒入的缓冲液略少 。为解决这些问题 ,我组 成员经过充分讨论,提出了如下的解决方案: 首先 ,在挖出凝胶条时,应注意控制胶板与 两侧钢丝的距离; 其次 ,再买一个电源适配器, 两个进行交替使用; 再其次 ,稍微多倒入 一些缓冲液。
8 月 23 日 ,我组成员进行第二次琼脂糖凝胶电泳色素分离实验 。有了昨天的实践经 验积累 ,我组成员仅用 30 分钟就完成了电泳前所有的工作准备 。之后 ,我组成员启动电 源适配器 ,但电源适配器无反应 。经过小组讨论 ,我组决定将其带到万虹桥电子市场进行 检修查看 。经过检修, 电源适配器被发现的确已损坏。
在电源适配器修好之后 ,我组成员加了检修者的微信 ,借助检修者的帮助 ,我们成功 发现了问题: 昨日实验后的判断是错误的 。我们在用鳄鱼夹导线连接电源适配器与电泳室 时 ,使用了错误的连接方法 ,导致电源适配器发生短路并造成严重损坏 。 因此 ,我们提出 解决方案: 用另外一根钢丝连接电源适配器接 口和鳄鱼夹导线一端 ,使电泳正常进行 。经 过检修后, 电源适配器正常工作, 电泳持续正常进行了 60 分钟直至我组成员关闭电源适 配器。
首先 ,本次实验各色素条带都正常迁移 ,绿色色素出现明显分离; 其次 ,红、橙色素 条带愈来愈淡直至肉眼无法看见 。经过小组讨论,初步判断今日实验问题: 为检修电源适 配器 ,我组成员出去了一 小时 ,在此期间, 色素均飘出上样孔 ,导致实验开始时上样孔中 的色素远远小于 2 毫升 。 因此 ,导致了红、橙色素条带看不清 。针对这个问题 ,我组成员 提出解决方案: 第一 ,在上样孔中加入足量色素; 第二 ,在上样后立刻开始电泳。
30 分钟
60 分钟